بیان نوترکیب و بررسی خصوصیات بیوشیمیایی ال- گلوتامیناز از سویه بومی Alteribacillus bidgolensis | ||
| زیست فناوری | ||
| Volume 16, Issue 3 - Serial Number 46, Spring 1404, Pages 42-56 PDF (1.17 M) | ||
| Document Type: پژوهشی اصیل | ||
| DOI: 10.48311/biot.2025.27531 | ||
| Authors | ||
| صبا معافی1; سجاد صاری خان* 2; عبدالحمید انگجی1; حسین غفوری3 | ||
| 1گروه زیست سلولی-مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران | ||
| 2بانک مولکولی، مرکز ملی ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران، جهاد دانشگاهی، تهران، ایران | ||
| 3گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران | ||
| Abstract | ||
| ال-گلوتامیناز یکی از اعضای خانواده آمیدوهیدرولاز هاست که به ابر خانواده بتا-لاکتاماز های وابسته به سرین و پروتئین های متصل به پنی سیلین تعلق دارد. در دهه اخیر ال-گلوتامیناز به خاطر توانایی کاتالیتیکی خود مورد توجه قرار گرفته است و در میان صنایع مختلف به ویژه پزشکی و درمانی ارزش بالایی یافته است. تحقیقات در مورد ال-گلوتامیناز در طول چهار دهه پیشرفت هایی داشته است اما در مقایسه با سایر آنزیم های مهم صنعتی این پیشرفت سرعت کمی داشته است. هزینه نسبتا بالای تولید ال-گلوتامیناز یکی از موانع بزرگی است که کاربرد های صنعتی آن را به تاخیر می اندازد. از طرفی منابع کافی برای تولید انبوه آنزیم به منظور بررسی آزمایشات کلینیکی گسترده موجود نمی باشد. هدف از این مطالعه بیان نوترکیب ال-گلوتامیناز به صورت محلول از سویه Alteribacillus bidgolensis(P4BT) در سیستم بیانیBL21(DE3) Escherichia coli و همچنین بررسی فعالیت آنزیم می باشد. در این پژوهش ژن ال-گلوتامیناز با استفاده از وکتور بیانی pET30a با موفقیت در سیستم بیانی BL21(DE3) E.coli کلون شد. بیان محلول در شرایط کشت دمای 28 درجه سانتی گراد و با کمک وکتور تجاری pG-KJE8 که حاوی مجموعه ای از چاپرون های مولکولی است انجام شد. در نهایت، سنجش فعالیت ویژه آنزیم خالص و دیالیز شده در دمای 40 درجه سانتی گراد و pH 8 انجام شد و فعالیت آنزیمی برای غلظت 8 میلی مولار سوبسترا U/ mg 01/0 ± 53/0 بدست آمد. Km ال-گلوتامیناز mM 10/3 و Vmax آن U/ mg 62/0 محاسبه شد. | ||
| Keywords | ||
| کلونینگ; بیان نوترکیب; Alteribacillus bidgolesis; ال-گلوتامیناز; چاپرون | ||
| References | ||
|
| ||
|
Statistics Article View: 202 PDF Download: 62 |
||
| Number of Journals | 45 |
| Number of Issues | 2,171 |
| Number of Articles | 24,674 |
| Article View | 24,448,446 |
| PDF Download | 17,555,311 |