الحفیان, سلیم, رضایی, زینب, شاهنگیان, سیده‌شیرین, حسن ساجدی, رضا (2023). بیان آنتی‌بادی تک دمینی ضد VEGF انسانی از طریق نمایش سطحی در E. coli با استفاده از‌ دمین انتهای آمین پروتئین هسته‌زایی یخ (INP). , 14(2), 37-51.
سلیم الحفیان; زینب رضایی; سیده‌شیرین شاهنگیان; رضا حسن ساجدی. "بیان آنتی‌بادی تک دمینی ضد VEGF انسانی از طریق نمایش سطحی در E. coli با استفاده از‌ دمین انتهای آمین پروتئین هسته‌زایی یخ (INP)". , 14, 2, 2023, 37-51.
الحفیان, سلیم, رضایی, زینب, شاهنگیان, سیده‌شیرین, حسن ساجدی, رضا (2023). 'بیان آنتی‌بادی تک دمینی ضد VEGF انسانی از طریق نمایش سطحی در E. coli با استفاده از‌ دمین انتهای آمین پروتئین هسته‌زایی یخ (INP)', , 14(2), pp. 37-51.
الحفیان, سلیم, رضایی, زینب, شاهنگیان, سیده‌شیرین, حسن ساجدی, رضا بیان آنتی‌بادی تک دمینی ضد VEGF انسانی از طریق نمایش سطحی در E. coli با استفاده از‌ دمین انتهای آمین پروتئین هسته‌زایی یخ (INP). , 2023; 14(2): 37-51.

بیان آنتی‌بادی تک دمینی ضد VEGF انسانی از طریق نمایش سطحی در E. coli با استفاده از‌ دمین انتهای آمین پروتئین هسته‌زایی یخ (INP)

زیست فناوری
Article 7, Volume 14, Issue 2 - Serial Number 37, 1402, Pages 37-51    PDF (1.15 M)
Document Type: پژوهشی اصیل
Authors
سلیم الحفیان1; زینب رضایی1; سیده‌شیرین شاهنگیان2; رضا حسن ساجدی* 1
1گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران
2گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
Abstract
آنژیوژنز در بسیاری از فرآیندهای فیزیولوژیک و پاتولوژیک از جمله رشد تومور دخالت دارد و VEGF مهم­ترین فاکتور در این فرایند محسوب می­شود. امروزه تولید آنتی­بادی های تک دمینی (VHH) با ویژگی مهار فاکتورهای رشد در تومورهای سرطانی یکی از راهکار­های جدید درمان سرطان می­باشد. در پژوهش قبلی ما مشخص شد VHHهای شتری تهیه شده با استفاده از نمایش فاژی علیه VEGF در مهار آن نقش اساسی ایفا می­کند. در این بین VHHی که دارای بیشترین تمایل به جایگاه اتصال به VEGF در بین دیگر اعضا کتاب­خانه فاژیVHH ها تهیه شده بود، انتخاب شد. با توجه به کارایی بیان سطحی E. coli با استفاده از موتیف لنگری پروتئین هسته‏زایی یخ (INP)، از این سیستم برای بیان پروتئین­ استفاده شد. از آنجا که در اتصال INP به سطح سلول فقط دمین انتهای آمینی نقش دارد، در طراحی سازه ژنی از 537 جفت باز ابتدایی ژن InaK استفاده شد. همچنین با قراردادن جایگاه برش آنزیم پروتئاز TEV بین INP وVEvhh10، امکان جداسازی موفقیت آمیز VEvhh10 از سطح سلول باکتری فراهم گردید. بیان سطحی با استفاده از پلاسمید pET-21a حاوی INP و VEvhh10علیه VEGF انجام شد. نتایج نشان داد دنباله INPگزینه مناسبی برای بیان سطحی VEvhh10در E. coli می­باشد. پس از تولیدVEvhh10 نوترکیب، جداسازی و تخلیص با استفاده از سانتریفیوژ و شستشوی متعدد انجام گرفته و اتصال آن به VEGF مورد بررسی قرار گرفت. اتصال موفقیت­آمیزVEvhh10 به VEGF نشان داد که پروتئین نوترکیب حاصل می­تواند برای کاربردهای درمانی و تشخیص بالینی بیماران در آینده مورد استفاده قرار گیرد.

Keywords
نمایش سطحی در باکتری; پروتئین هسته‌زایی یخ; VHH; آنژیوژنز; فاکتور رشد اندوتلیال رگی
References
Statistics
Article View: 200
PDF Download: 111
Statistics
Number of Journals45
Number of Issues2,171
Number of Articles24,674
Article View24,431,576
PDF Download17,550,001