آریائی نژاد, شهره, ملکی, مرتضی, نوشی ندامانی, صفورا, کاوسی, کاوه, حسینی سالکده, قاسم (2022). شناسایی، کلون، بیان و خالص سازی آنزیم نوترکیب جدید زایلاناز با مقاومت ساختاری بالا از جمعیت میکروبی شکمبه گوسفند. , 12(2), 51-66.
شهره آریائی نژاد; مرتضی ملکی; صفورا نوشی ندامانی; کاوه کاوسی; قاسم حسینی سالکده. "شناسایی، کلون، بیان و خالص سازی آنزیم نوترکیب جدید زایلاناز با مقاومت ساختاری بالا از جمعیت میکروبی شکمبه گوسفند". , 12, 2, 2022, 51-66.
آریائی نژاد, شهره, ملکی, مرتضی, نوشی ندامانی, صفورا, کاوسی, کاوه, حسینی سالکده, قاسم (2022). 'شناسایی، کلون، بیان و خالص سازی آنزیم نوترکیب جدید زایلاناز با مقاومت ساختاری بالا از جمعیت میکروبی شکمبه گوسفند', , 12(2), pp. 51-66.
آریائی نژاد, شهره, ملکی, مرتضی, نوشی ندامانی, صفورا, کاوسی, کاوه, حسینی سالکده, قاسم شناسایی، کلون، بیان و خالص سازی آنزیم نوترکیب جدید زایلاناز با مقاومت ساختاری بالا از جمعیت میکروبی شکمبه گوسفند. , 2022; 12(2): 51-66.

شناسایی، کلون، بیان و خالص سازی آنزیم نوترکیب جدید زایلاناز با مقاومت ساختاری بالا از جمعیت میکروبی شکمبه گوسفند

زیست فناوری
Article 4, Volume 12, Issue 2 - Serial Number 29, 1400, Pages 51-66    PDF (433.9 K)
Document Type: پژوهشی اصیل
Authors
شهره آریائی نژاد* 1; مرتضی ملکی2; صفورا نوشی ندامانی1; کاوه کاوسی3; قاسم حسینی سالکده1
1بخش زیست شناسی سامانه ها، پژوهشگاه بیوتکنولوژی کشاورزی ایران، سازمان تحقیقات آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران
21- بخش زیست شناسی سامانه ها، پژوهشگاه بیوتکنولوژی کشاورزی ایران، سازمان تحقیقات آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران
32- آزمایشگاه سیستم های زیستی پیچیده و بیوانفورماتیک، گروه بیوانفورماتیک، مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک، دانشگاه تهران، تهران، ایران
Abstract
با توجه به نقش مهم آنزیم­ها در تسهیل عملکرد فرایند­های مختلف، استفاده از آن­ها در اغلب صنایع بسیار مورد توجه است. درصد بسیار پایینی از میکروارگانیسم­های تولید کننده­ی آنزیم­های جدید در محیط آزمایشگاهی قابل کشت می­باشند، این درحالی است که متاژنوم منبع عظیمی از اطلاعات ژنتیکی آنزیم­های ناشناخته را می­تواند در اختیار ما قرار دهد. با توجه به اهمیت استفاده از آنزیم­ها در صنایع گوناگون، آنزیم­هایی با ساختار پایدار و مقاوم در برابر حرارت، کاربرد و عملکرد بهتری را نشان می­دهند و تحقیقات زیادی در زمینه­ی شناسایی و تولید آن­ها به صورت پیوسته صورت گرفته است.

در این پژوهش با استفاده از روش­های محاسباتی، پیشگویی تعیین ساختار و استفاده از توالی آنزیم­های زایلاناز مستخرج از داده­های متاژنوم شکمبه­ی گوسفند، آنزیم زایلانازی با ساختار بسیار مقاوم شناسایی و به صورت نوترکیب تولید شد. آنزیم زایلاناز نوترکیب مقاوم به حرارت، PersiXyn5 نام­­گذاری شده و از DNA استخراج شده از محتویات شکمبه گوسفند کلون و در باکتری E.coli بیان و خالص گردید. فعالیت ویژه و پارامترهای کینتیکی Km و Vmax برای این آنزیم محاسبه شده و فعالیت بهینه این آنزیم در دمای 80 درجه سانتی­گراد و pH 8 مشاهده شد. آنزیم زایلاناز نوترکیب جدید پس از 2 ساعت تیمار در دمای 90 درجه سانتی­گراد 58 درصد فعالیت خود را حفظ کرد. با توجه به اینکه آنزیم زایلاناز مورد مطالعه مقاوم در دمای بالا و فعال در محیط قلیایی است برای استفاده در صنایع کاغذسازی، تهیه­ی خوراک طیور و تولید سوخت زیستی مناسب می­باشد.
Keywords
زایلاناز; آنزیم نوترکیب; متاژنوم; پایداری دمایی
References
Statistics
Article View: 215
PDF Download: 101
Statistics
Number of Journals45
Number of Issues2,160
Number of Articles24,577
Article View19,959,628
PDF Download16,091,015