جداسازی، خالصسازی و تعیین ویژگیهای بیوشیمیایی آنزیم کاتکول 1و 2 دی اکسیژناز از فلور میکروبی خاکهای آلوده نفتی | ||
| زیست فناوری | ||
| Article 11, Volume 11, Issue 2 - Serial Number 25, 1399, Pages 217-224 PDF (555.73 K) | ||
| Document Type: پژوهشی اصیل | ||
| Authors | ||
| فائزه ربانی1; وهب جعقریان* 2; احمد آسوده3 | ||
| 1دانشجوی سابق کارشناسی ارشد، گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه زنجان | ||
| 2دانشیار گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، دانشگاه زنجان | ||
| 3استاد گروه شیمی، دانشکده علوم، دانشگاه فردوسی مشهد | ||
| Abstract | ||
| پژوهش حاضر با هدف خالصسازی و شناسایی بیوشیمیایی آنزیم تجزیهکننده فنول از باکتریهای موجود در خاکهای حاوی آلایندههای نفتی انجام پذیرفت. پروتئین کاتکول 1و 2 دی اکسیژناز از باکتریAneurinibacillus migulanus Isolate ZNU05 استخراج و با استفاده از ستون کروماتوگرافی تبادل یونی Q-Sepharoseتخلیص شد. فعالیت آنزیم در pHهای مختلف بین 4 تا 9، محدوده دمایی20 تا 70 درجه سلسیوس، و در حضور نمک کلرید یونهای فلزی مختلفی مانند 2+ Ca، K+، Mn2+،Co2+ ،Zn 2+،Mg2+ ،Cu2+، + Na و حلالهای گوناگون شامل اتانول، اتیلاستات، پترولیوماتر، استونیتریل، ان-آمیلالکل، ان-هگزان و تولوئن ارزیابی شد. همچنین فعالیت این آنزیم با استفاده از سوبستراهای گوناگون مانند فنول، کتکول، بنزوئیک اسید، پیروگالول و آلفا ـ نفتول بررسی گردید. آنالیز پروتئین به روش SDS-PAGE بیانگر وجود تک باند پروتئینی با وزن مولکولی حدود 40 کیلودالتون بود. نتایج تعیین ویژگی آنزیم کتکول 1و2 دی اکسیژناز نشان داد که pH و دمای مطلوب به ترتیب 5/8 و 30 درجه سلسیوس بود. فعالیت کاتالیتیکی آنزیم در حضور یونهای کلرید کبالت و روی (5 میلیمولار) و همچنین حلال آلی آمیل الکل، افزایش یافت، ولی دیگر یونهای فلزی و حلالهای آلی بکار رفته باعث کاهش و یا مهار فعالیت آنزیم شدند. از میان سوبستراهای مختلف بر روی فعالیت آنزیم، کتکول سوبسترای بسیار مطلوبتری برای آنزیم بود، به طوری کهVmax و Km آنزیم برای این سوبسترا به ترتیب 959/8 واحد بر میلیگرم و 992/4 میکرومول بر میلیلیتر میباشد. | ||
| Keywords | ||
| آلاینده نفتی; تجزیه فنول; تخلیص پروتئین; کتکول 1و2 دی اکسیژناز | ||
| References | ||
|
| ||
|
Statistics Article View: 222 PDF Download: 96 |
||
| Number of Journals | 45 |
| Number of Issues | 2,171 |
| Number of Articles | 24,674 |
| Article View | 24,447,975 |
| PDF Download | 17,555,113 |