کاووسی, سعیده, شیرزاد, هادی, جلیلی, شیرین, صادقی‌زاده, مجید, مطهری, پریا (2019). پایش سمیت سرب به‌وسیله زیست‌حسگر لوسیفراز رده سلولی Huh7-1x-ARE-luc. , 10(1), 125-131.
سعیده کاووسی; هادی شیرزاد; شیرین جلیلی; مجید صادقی‌زاده; پریا مطهری. "پایش سمیت سرب به‌وسیله زیست‌حسگر لوسیفراز رده سلولی Huh7-1x-ARE-luc". , 10, 1, 2019, 125-131.
کاووسی, سعیده, شیرزاد, هادی, جلیلی, شیرین, صادقی‌زاده, مجید, مطهری, پریا (2019). 'پایش سمیت سرب به‌وسیله زیست‌حسگر لوسیفراز رده سلولی Huh7-1x-ARE-luc', , 10(1), pp. 125-131.
کاووسی, سعیده, شیرزاد, هادی, جلیلی, شیرین, صادقی‌زاده, مجید, مطهری, پریا پایش سمیت سرب به‌وسیله زیست‌حسگر لوسیفراز رده سلولی Huh7-1x-ARE-luc. , 2019; 10(1): 125-131.

پایش سمیت سرب به‌وسیله زیست‌حسگر لوسیفراز رده سلولی Huh7-1x-ARE-luc

زیست فناوری
Article 16, Volume 10, Issue 1 - Serial Number 20, 1397, Pages 125-131    PDF (618.77 K)
Authors
سعیده کاووسی1; هادی شیرزاد* 2; شیرین جلیلی2; مجید صادقی‌زاده1; پریا مطهری1
1گروه ژنتیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
2پژوهشگاه علوم انتظامی و مطالعات اجتماعی، تهران، ایران
Abstract
اهداف: تجمع رادیکال‌های آزاد در بدن با ایجاد استرس اکسیداتیو منجر به تخریب پلیمرهای زیستی می‌شود. به‌دلیل ورود فلزات سنگین به محیط‌های آبی و خاکی، یافتن روش‌های کارآمد برای شناسایی و اندازه‌گیری میزان فلزات سنگین لازم است. زیست‌حسگرهای سلولی می‌توانند در حضور یک محرک از جمله فلزات سنگین، سیگنالی قابل اندازه‌گیری تولید کنند. در این تحقیق رده سلولی Huh۷-۱x-ARE-luc تحت کنترل پروموتر حساس به حضور اکسیدان‌ها با هدف پایش سرب استفاده شد و کارآیی آن در سنجش سمیت این مواد به واسطه آرمایش‌های لوسیفراز و Real time-PCR بررسی شد.

مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، بعد از ترنسفکشن وکتور نوترکیب سنجش فعالیت ژن لوسیفراز در نمونه‌های تیمارشده با سرب انجام شد. تعدادی از کلون‌های تاییدشده با فنوتیپ پایدار بعد از پاساژ پنجم برای بررسی بیان ژن لوسیفراز در غلظت‌های صفر تا ۸۰ماکرومولار از سرب بررسی شدند. سپس قابلیت مهارکنندگی به روش assay MTT و تغییرات بیان ژن‌های مسیر اکسیداتیو توسط Real time-PCR بررسی شد. تحلیل‌های آماری با روش ∆Ct و با استفاده از نرم‌افزار graphpad prism ۶ انجام شد.

یافته‌ها: میزان بیان ژن گزارشگر همراه با افزایش ماده اکسیداتیو افزایش یافت. کاهش بیان ژن گزارشگر بعد از غلظت ۳۰ماکرومولار سرب قابل مشاهده بود. غلظت ۳۵ماکرومولار سرب، متابولیسم ۵۰% سلول‌ها را مهار کرد. بیان ژن‌های مسیر آنتی‌اکسیدانی در سلول‌های تیمارشده با سرب ۳۰ماکرومولار نسبت به ژن کنترل، افزایش معنی‌داری داشت.

نتیجه گیری: زیست‌حسگر تهیه‌شده از رده سلولی نوترکیب Huh۷-۱x-ARE-luc حامل ژن گزارشگر می‌تواند وسیله مناسب و کارآمدی برای سنجش ترکیبات اکسیداتیو همچون فلزات سنگینی چون سرب باشد.
Keywords
ژن گزارشگر; زیست‌حسگر; استرس اکسیداتیو; توالی پاسخگوی آنتی‌اکسیدانی
References
Statistics
Article View: 204
PDF Download: 90
Statistics
Number of Journals45
Number of Issues2,160
Number of Articles24,577
Article View20,142,542
PDF Download16,170,216