تثبیت آنزیم اندوگلوکاناز AaCel9A برروی ماکروبیدهای کیتوزانی | ||
| زیست فناوری | ||
| Article 8, Volume 7, Issue 1 - Serial Number 12, 1395, Pages 60-70 PDF (447.52 K) | ||
| Authors | ||
| پرستو رحیمی زاده1; سعید نژاوند* 2; محمد پاژنگ3; علیرضا امانی قدیم4; نادر چاپارزاده4; فرشته سادات یونسی5 | ||
| 1دانشجو/دانشگاه شهید مدنی آذربایجان | ||
| 2هیئت علمی- دانشگاه شهید مدنی آذربایجان | ||
| 3هیات علمی/دانشگاه شهید مدنی آذربایجان | ||
| 4هیات علمی/ دانشگاه شهید مدنی آذربایجان | ||
| 5دانشجو/ دانشگاه شهید مدنی آذربایجان | ||
| Abstract | ||
| سلولاز آنزیمی پرکاربرد در صنایع مختلف می باشد. تثبیت سلولاز یکی از روشهای پایدارسازی آن است که نه تنها امکان جداسازی آنزیم از واکنش، بلکه امکان استفاده مجدد از آن را فراهم میسازد و در نتیجه هزینه استفاده آنزیم در صنعت به طور قابل توجهی کاهش مییابد. استفاده از کیتوزان به عنوان بستر جهت تثبیت آنزیم و استفاده گسترده آن در فرآیندهای صنعتی همواره مورد توجه بوده است. ویژگیهای فوق العاده از جمله زیست سازگاری، زیست تخریب پذیری و غیر سمی بودن آن، کیتوزان را بستری مناسب جهت فرآیند تثبیت معرفی میکند. در این مطالعه توالی ژنی کد کننده آنزیم اندوگلوکاناز AaCel9A در وکتور بیانی pET28a(+) همسانه سازی شد. نتایج حاصل از تعیین توالی مؤید قرارگیری صحیح قالب ژنی AaCel9A در وکتور بود. سپس وکتور حاوی ژن به سلول های مستعد اشریشیا کلی سویه BL21 منتقل شده و بیان پروتئین در آن ها القا شد. بیان آنزیم با استفاده از روش الکتروفورز SDS-PAGE و سنجش فعالیت آنزیم تایید و با ستون نیکل آگارز تخلیص بعمل آمد. ساخت ماکروبیدهای کیتوزان با روش ژله ای شدن صورت گرفت. مولکولهای آنزیم با استفاده از لینکرهای گلوتارآلدئیدی به صورت کووالان به بستر متصل و تایید تثبیت آنزیم توسط FTIR و نیز سنجش فعالیت آنزیمی از ماکروبیدهای حاوی آنزیم انجام پذیرفت. آنالیز نتایج نشان داد که بهترین شرایط برای تثبیت کوالان آنزیم بر روی بستر در غلظت گلوتارآلدئید 7/0% و بافر سدیم فسفات (7 pH) می باشد. همچنین آنالیز برادفورد و سنجش فعالیت آنزیمی مؤید تثبیت 85% از مولکولهای آنزیم برروی بستر بود. | ||
| Keywords | ||
| اندوگلوکاناز AaCel9A; پایدار سازی; تثبیت; کیتوزان | ||
|
Statistics Article View: 228 PDF Download: 73 |
||
| Number of Journals | 45 |
| Number of Issues | 2,160 |
| Number of Articles | 24,576 |
| Article View | 19,915,862 |
| PDF Download | 16,073,344 |