همسانهسازی ژن LysA در وکتور بیانی در راستای افزایش تولید اسیدآمینه L- لیزین | ||
| زیست فناوری | ||
| Article 8, Volume 2, Issue 1 - Serial Number 2, 1390 PDF (202.46 K) | ||
| Authors | ||
| سارا چراغی* 1; عظیم اکبرزاده2; رضا حاجی حسینی3; هادی انصاری هادیپور4; سمیه حمزه ای تاج2; سمانه خادمی مزده2; محمدرضا مهرابی2; علی فرهنگی2; زهرا صفاری2; سهیل قاسمی5 | ||
| 1انستیتو پاستور | ||
| 2انستیتوپاستور ایران | ||
| 3دانشگاه پیام نور | ||
| 4دانشگاه اراک | ||
| 5انستیوپاستور ایران | ||
| Abstract | ||
| L – لیزین یکی از اسیدهایآمینه ضروری است که در تغذیه انسان و دام اهمیت بسزایی دارد. این اسیدآمینه به دلیل کاربرد بسیار در صنایع دارویی و غذایی حائز اهمیت میباشد. تولید صنعتی لیزین از نظر اقتصادی بسیار مهم است. سالانه چندین هزار تن لیزین در جهان بوسیله Corynebacterium glutamicum تولید میشود. روش بررسی: پس از تهیه پرایمرهای اختصاصی با دو توالی برشی برای آنزیمهای NheI و HindIII، ژن مورد نظر با روش PCR تکثیر یافت و جهت تعیین ترادف و هضم آنزیمی مناسب در وکتور pTZ57R/T کلون گردید. پس از تعیین ترادف و اطمینان از صحت ژن مورد نظر، قطعه ژنی با انتهای چسبنده در وکتور بیانی pET28a کلون و در سویه E.coli BL21(DE3) ترانسفورم گردید. پلاسمید نوترکیب با روشهای هضم آنزیمی و تعیین ترادف ارزیابی شد. یافتهها: ژن LysA به طول kb 3/1 با توالی صحیح کلون گردید. هضم آنزیمی با موفقیت انجام شد بدین ترتیب که ژن LysA به طور کامل از پلاسمید جدا گردید. همسانه سازی با استفاده از SDS-PAGE تایید شد. بحث: در این مطالعه برای اولین بار بیان ژن آنزیم دیآمینوپیمیلاتدکربوکسیلاز (4.1.1.20 EC) همسانه گردید و وکتور بیانی بررسی شد. | ||
| Keywords | ||
| "; دی آمینوپیمیلات دکربوکسیلاز"; -"; کورینه باکتریوم گلوتامیکوم"; - "; pET28a"; pTZ57R/T " | ||
|
Statistics Article View: 173 PDF Download: 92 |
||
| Number of Journals | 45 |
| Number of Issues | 2,171 |
| Number of Articles | 24,674 |
| Article View | 24,394,618 |
| PDF Download | 17,534,974 |